Gelová elektroforéza
Technology
12 hours ago
8
4
2
Author
Albert FloresGelová elektroforéza je metoda pro separaci a analýzu makromolekul (DNA, RNA a proteinů) v závislosti na jejich velikosti či tvaru a náboji. Jedná se o druh elektroforézy, která využívá gelu o různé velikosti pórů, skrze které se fragmenty makromolekul pohybují. Horizontální gelová elektroforéza (vlevo elektroforetická vana, vpravo zdroj elektrického napětí Nejčastěji používanými typy gelové elektroforézy je elektroforéza DNA v agaróze a elektroforéza proteinů v polyakrylamidovém gelu při metodě SDS-PAGE. * Typy gelů ** Agaróza ** Polyakrylamid ** Škrob
* Podmínky ** Denaturující v přítomnosti detergentu, nejčastěji SDS *** Redukující podmínky, které rozrušují kovalentní disulfidické můstky, které jsou nejčastěji zajištěny přítomností beta-merkaptoethanolu nebo dithiotreitolu ** Nativní, při kterých si protein zachovává přirozenou konformaci
* Vizualizace po rozdělení vzorku elektroforézou ** Analýza DNA *** Ethidium bromid *** Sybr Green ** Analýza proteinů *** Coomassie Brilliant Blue *** Barvení stříbrem